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Guias e Dicas
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Agar Mac Conkey: Instruções de Uso e Microrganismos, Slides de Microbiologia

Agar mac conkey é um meio seletivo utilizado para o isolamento e identificação de enterobacteriaceae, especialmente em amostras clínicas. As instruções de uso do meio, seus ingredientes e as características de crescimento de alguns microrganismos, como escherichia coli, proteus mirabilis, salmonella typhimurium e staphylococcus aureus.

O que você vai aprender

  • Como se prepara o Agar Mac Conkey?
  • Quais microrganismos são detectados pelo Agar Mac Conkey?
  • Qual é a finalidade do Agar Mac Conkey?

Tipologia: Slides

2021

Compartilhado em 03/03/2021

haron-gabriel-de-cicco
haron-gabriel-de-cicco 🇧🇷

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Agar Mac Conkey – Rev.02 – 11/14
INSTRUÇÕES DE USO
AGAR MAC CONKEY
Meio seletivo e diferencial recomendado para o isolamento de Enterobacteriaceae a partir de amostras clínicas,
lacticínios e amostras farmacêuticas de acordo com a Farmacopeia Européia.
Descrição
O Agar Mac Conkey é um meio seletivo utilizado para o isolamento e identificação da Enterobacteriaceae
encontrada em fezes, urina, águas residuais e alimentos. O meio também é utilizado para diferenciar coliformes
de enterobactérias patogênicas não fermentadoras de lactose. A digestão pancreática de gelatina e a p eptona
fornecem para o meio os nutrientes básicos como: nitrogênio, vitaminas, minerais e aminoácidos. A lactose
fornece o carboidrato como fonte de energia. O cloreto de sódio otimiza o crescimento de Salmonella e
Shigella. Os sais biliares n°3 e o cristal violeta são os agentes seletivos. O vermelho neutro é um indicador d e
pH. O agar bacteriológico é o agente solidificante. A fermentação de lactose por coliformes provoca a
acidificação do meio com uma consequente precipitação dos sais biliares e a absorção do vermelho neutro. Os
coliformes crescem como colônias vermelho-violeta circundadas por uma zona de precipitação. As cepas não
fermentadoras de lactose (Salmonella spp. e Shigella spp.) crescem transparentes incolores e sem nenhuma
zona de precipitação.
Preparação
- Suspender 51.5g de pó em 1 litro de água destilada ou deionizada. Aquecer até dissolver completamente.
Dispensar em tubos, garrafas, frascos, etc., conforme necessidade. Esterilizar em autoclave a 121ºC por 15
minutos.
- A adição de 100mg de 4-metilumbeliferil-β-D-glucuronídeo (suplemento MUG) em 1 litro de Agar Mac Conkey
fornece ao meio as características para detecção da enzima β-glucuronidase produzidas principalmente pela
Escherichia coli. Desta forma colônias de E.coli podem ser rapidamente detectadas mesmo em culturas mistas,
através da análise das placas sob a lâmpada UV a 3 66 nm, após incubação durante a noite à 36 ± 1°C. As
colônias de E.coli aparecem com coloração azul fluorescente.
Técnica
Inocular a amostra de modo a obter colônias isoladas, semeando por esgotamento a superfície do meio
utilizando uma alça de inoculação estéril. Incubar a 36 ± 1°C entre 18-24 horas.
Composição g/l
Digestão Pancreática de Gelatina 17.0
Peptona 3.0
Lactose 10.0
Sais Biliares n°3 1.5
Cloreto de Sódio 5.0
Vermelho Neutro 0.03
Cristal Violeta 0.001
Agar 15.0
pH Final= 7.1 ± 0.2 à 25°C.
Aparência do Meio:
Desidratado: Pó bege rosado, fluído e homogêneo.
Preparado: Pó vermelho-rosado, levemente opalescente sem precipitado significativo.
Controle de Qualidade:
Condições de incubação: 36 ± 1°C por 18-24 horas.
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Agar Mac Conkey – Rev.02 – 11/14^1

INSTRUÇÕES DE USO

AGAR MAC CONKEY

Meio seletivo e diferencial recomendado para o isolamento de Enterobacteriaceae a partir de amostras clínicas, lacticínios e amostras farmacêuticas de acordo com a Farmacopeia Européia.

Descrição O Agar Mac Conkey é um meio seletivo utilizado para o isolamento e identificação da Enterobacteriaceae encontrada em fezes, urina, águas residuais e alimentos. O meio também é utilizado para diferenciar coliformes de enterobactérias patogênicas não fermentadoras de lactose. A digestão pancreática de gelatina e a peptona fornecem para o meio os nutrientes básicos como: nitrogênio, vitaminas, minerais e aminoácidos. A lactose fornece o carboidrato como fonte de energia. O cloreto de sódio otimiza o crescimento de Salmonella e Shigella. Os sais biliares n°3 e o cristal violeta são os agentes seletivos. O vermelho neutro é um indicador de pH. O agar bacteriológico é o agente solidificante. A fermentação de lactose por coliformes provoca a acidificação do meio com uma consequente precipitação dos sais biliares e a absorção do vermelho neutro. Os coliformes crescem como colônias vermelho-violeta circundadas por uma zona de precipitação. As cepas não fermentadoras de lactose (Salmonella spp. e Shigella spp.) crescem transparentes incolores e sem nenhuma zona de precipitação.

Preparação

  • Suspender 51.5g de pó em 1 litro de água destilada ou deionizada. Aquecer até dissolver completamente. Dispensar em tubos, garrafas, frascos, etc., conforme necessidade. Esterilizar em autoclave a 121ºC por 15 minutos.
  • A adição de 100mg de 4-metilumbeliferil-β-D-glucuronídeo (suplemento MUG) em 1 litro de Agar Mac Conkey fornece ao meio as características para detecção da enzima β-glucuronidase produzidas principalmente pela Escherichia coli. Desta forma colônias de E.coli podem ser rapidamente detectadas mesmo em culturas mistas, através da análise das placas sob a lâmpada UV a 366 nm, após incubação durante a noite à 36 ± 1°C. As colônias de E.coli aparecem com coloração azul fluorescente.

Técnica Inocular a amostra de modo a obter colônias isoladas, semeando por esgotamento a superfície do meio utilizando uma alça de inoculação estéril. Incubar a 36 ± 1°C entre 18-24 horas.

Composição g/l

Digestão Pancreática de Gelatina 17.

Peptona 3.

Lactose 10.

Sais Biliares n°3 1.

Cloreto de Sódio 5.

Vermelho Neutro 0.

Cristal Violeta 0. Agar 15. pH Final= 7.1 ± 0.2 à 25°C.

Aparência do Meio: Desidratado: Pó bege rosado, fluído e homogêneo. Preparado: Pó vermelho-rosado, levemente opalescente sem precipitado significativo.

Controle de Qualidade: Condições de incubação: 36 ± 1°C por 18-24 horas.

Agar Mac Conkey – Rev.02 – 11/14^2

Microrganismos ATCC Crescimento^ Características

Enterococcus faecalis 19433 Parcialmente inibido -

Escherichia coli 25922 Bom Colônias rosa com precipitado de bile Proteus mirabilis 25933 Bom Colônias incolores Salmonella typhimurium (^14028) Bom Colônias incolores Staphylococcus aureus (^25923) Inibido -

Desempenho e Limitações Embora o Agar Mac Conkey seja primariamente seletivo para bacilos entéricos gram-negativos, testes bioquímicos, e se indicados, testes sorológicos utilizando culturas puras são recomendados para a identificação completa.

Armazenamento e Transporte O pó é muito higroscópico: armazenar entre 10-30°C, em um ambiente seco, em sua embalagem original bem fechada. Utilizar antes da data de validade informada no rótulo ou até que os sinais de deterioração ou contaminação sejam evidentes. Armazenar as placas preparadas entre 2-8°C.

Descarte Não descartar em esgotos ou lixos domésticos. O produto deve ser tratado conforme as regulações oficiais administrativas. Soluções em excesso e não recicláveis destinar para empresa responsável. As embalagens contaminadas devem ser eliminadas como produto não utilizado.

Apresentação: Frasco com 500 gramas.

Modelo: K25-

Referências:

  1. United States Pharmacopoeia 24, 2000. Microbial Limit Tests, 1814-1818.
  2. FDA (1995). Bacteriological Analytical Manual, 8th ed. Revision A., 1998. Published by AOAC International.
  3. NCCLS document M22-A2, 1996. Quality Assurance for Commercially prepared Microbiological Culture Media 2nd ed.; Approved Standard.

Para maiores informações: Tel: (41) 3535-0900 E-mail: kasvi@kasvi.com.br Fax: (41) 3535-0901 URL: www.kasvi.com.br