UNIVERSIDADE ESTADUAL DO RIO GRANDE DO SUL
ENGENHARIA DE BIOPROCESSOS E BIOTECNOLOGIA
RECUPERAÇÃO E PURIFICAÇÃO DE BIOPRODUTOS
ATIVIDADE AVALIATIVA 4
INSTRUÇÕES: acesse o livro de “purificação de Produtos Biotecnológicos” na biblioteca virtual
da Uergs e utilize o capítulo 6 “Precipitação de Proteínas” e responda as questões abaixo.
1) A precipitação de proteínas pode ser realizada através de alterações no soluto ou na
solubilidade da própria proteína. Descreva os fundamentos destas duas formas de precipitar
proteínas e cite exemplos.
Proteínas precipitadas tem sua estrutura tridimensional modificada. Trata-se, portanto de
método agressivo para essas moléculas, pois sua função bioquímica depende da estrutura. A
aplicação desse método somente e viável, portanto, quando a adequada conformação da
proteína e recuperada após precipitação. Em soluções aquosas a precipitação pode ocorrer com
o aumento(salting-out) ou diminuição( salting-in) da força iônica por meio da variação da
concentração de sais, o a adoção de solventes orgânicos, polietrolitos,polimeros não iônicos
calor, ajuste de pH e solventes orgânicos, cada qual com seus principios,vantagens e
desvantagens.
2) Quando em solução aquosa, como ocorre ficam organizados os resíduos de aminoácidos
para o enovelamento (folding) das proteínas?
Em solução aquosa o folding e o enovelamento do glóbulo de proteínas, e regido pela
hidrofobicidade, de tal forma que os resíduos apolares são encontrados no interior da molécula
e os resíduos carregados e polares tendem a se encontrar no exterior da proteína. Essa
disposição promove mínimo contato dos resíduos hidrofóbicos com o solvente aquoso, ao
mesmo tempo, maximiza as interações entre resíduos polares e resíduos com carga com o
solvente. Mesmo assim, alguns resíduos hidrofóbicos permanecem na superfície em contato
com solventes.
3) Explique como devem ocorrer as interações soluto-solvente e soluto-soluto para que ocorra
a solubilização.
A solubilidade de um soluto em um solvente e determinada pelo resultado global das interações
atrativas e repulsivas entre as moléculas de solvente e de soluto. A solubilidade e favorecida
quando as interações entre as moléculas de soluto são repulsivas e as interações do soluto com
as moléculas dos solventes são atrativas. Com isso, uma molécula pode se tornar insolúvel por
qualquer perturbação que resulte em diminuição das forças atrativas com o solvente, ou então,
em um aumento das interações atrativas entre as moléculas de soluto. As interações entre as
moléculas de soluto e solvente geralmente são ligações não covalentes, pois não existe
compartilhamento de elétrons e podem ser agrupadas em dois tipos de interações
eletrostáticas(dipolo-dipolo) e força de van der waals.
4) De que forma o pH interfere nas cargas das proteínas.
PH exerce influência notável na presença ou ausência de cargas. Uma vez que o ph do solvente
regula o grau de dissociação dos grupamentos ácidos e básicos de uma proteína. Esse
